副流感病毒IgG/IgM ELISA檢測試劑盒

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：副流感1/2/3 IgG ELISA試劑盒

英文名稱： Parainfluenza 1/2/3 IgG ELISA

【產(chǎn)品規(guī)格】

96T

【預期用途】

副流感病毒IgG抗體檢測試劑盒，此酶免試劑盒可用于人血清中抗副流感病毒1/2/3 IgG抗體的體外定性和定量檢測。

【前言簡介】

副流感病毒感染是一種通過空氣傳播并在各個地域都會出現(xiàn)的傳染病。副流感病毒在1歲大嬰兒中的血清學流行率為50%。副流感病毒的典型特征是頻繁的再感染,副流感病毒3的主要特征為：其潛伏期為2-6天。副流感病毒是副粘病毒的一個亞種。它和呼吸道合胞病毒(RSV)一起屬于呼吸道疾病的主要病毒性病原體，并且這種呼吸道感染會伴隨有嚴重的臨床癥狀。在成年人中，副流感病毒會引起嚴重的鼻咽炎。副流感病毒感染開始的癥狀表現(xiàn)為突然間的頭疼、肌肉疼痛和關節(jié)痛，接下來就出現(xiàn)38-39°C的高燒。如果下感染了下呼吸道，則又會出現(xiàn)氣管支氣管炎的癥狀：聲音嘶啞和干咳。在新生兒中，副流感病毒1會引起嚴重的肺炎，主要表現(xiàn)為高燒、黃萎病、呼吸困難和膿血痰。有時候還會出現(xiàn)腦膜炎的癥狀。在嬰兒和兒童中，副流感病毒2經(jīng)常會引起急性喉氣管支氣管炎和假格魯布。它首先表現(xiàn)為鼻黏膜炎的癥狀，之后出現(xiàn)呼吸困難、干咳和呼吸急促。副流感病毒3被認為是引起肺炎和細支氣管炎的主要病原體。副流感病毒1/2/3分布于全球各個地方都存在，而副流感病毒4僅出現(xiàn)在美國。流感病毒1和流感病3的感染一年四季都會出現(xiàn)，而流感2和4的感染只是偶爾出現(xiàn)。副流感病毒的實驗室檢測方法有血細胞凝集檢測、補體結(jié)合實驗和中和實驗。新方法有IFA和ELISA，它們可以鑒別出病人血清中的IgG和IgA抗體。在鑒別診斷中，由于交叉反應，我們必須進行麻疹病毒、船運熱病毒和猿病毒5等副粘病毒的檢測。

【檢測原理】

副流感病毒IgG抗體檢測試劑盒，此固相ELISA試劑盒利用的夾心法原理。包被板上包被了抗原。用對人IgG具有特異性的酶標二抗來檢測結(jié)合到包被抗原的樣品特異性抗體。底物反應后，所顯示的顏色強度與檢測到的IgG特異性抗體的量成正比。樣品的結(jié)果可直接使用標準曲線得。

實驗步驟

1) 加100µL標準品和已稀釋樣本于相應反應孔中，在定性檢測中只使用標準品B。

2) 封板后室溫（18℃-25℃）溫育60分鐘。

3) 移去粘性金屬板，棄去孔中液體。用300µL洗滌液洗板3次，在吸水紙上拍干。

4) 在每一微孔中加入100µL酶聯(lián)物。

5) 封板后室溫（18℃-25℃）溫育30分鐘。

6) 移去粘性金屬板，棄去孔中液體。用300µL洗滌液洗板3次，在吸水紙上拍干。加底物液和終止液時，如果有條件的話，可使用8孔微量移液器。確保底物液和終止液都是相同的時間間隔加入。使用確切容積并避免氣泡產(chǎn)生。

7) 每孔加TMB底物液100µL。

8) 室溫（18℃-25℃）避光溫育20分鐘。

9) 在每一微孔中加入100µL TMB終止液以終止底物反應。輕輕搖動包被板以使試劑混合均勻。此時，顏色藍色變成黃色。

10) 加終止液后60分鐘內(nèi)在450nm處測OD值。

【結(jié)果計算】

在半對數(shù)坐標紙上或用自動生成的方法，以標準品的OD值為Y軸，濃度為X軸，繪制一標準曲線圖。用立體圖、4參數(shù)對數(shù)圖或?qū)?shù)-對數(shù)圖都可獲得良好的實驗結(jié)果。對于標準曲線圖，用標準品的每一單值進行計算（樣品結(jié)果明顯異常的值必須刪除掉，應使用更加合理的單值）。樣品的濃度可直接從標準曲線上獲得。一旦樣品稀釋了，就應當乘以相應的稀釋因子。如果樣品所測得的濃度高于最高標準，則應根據(jù)實驗前的準備說明所述對樣品進行稀釋，并重新檢測。

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