過(guò)敏原總IgEelisa檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

elisa操作洗板 過(guò)程常見(jiàn)問(wèn)題及解答
1） 采用手工洗板， 孔與孔之間液體交叉。
2） 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3） 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。
解決辦法：
1） 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后*在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2） 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。

3 )  手工洗板，每次加液后浸泡30s左右，保證洗板的效果。

通用名稱：總IgE檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
英文名稱：Total- IgE ELISA
產(chǎn)品貨號(hào)：RE59061
產(chǎn)品規(guī)格：96T
檢測(cè)樣本：血清和血漿
公司品牌：德國(guó)IBL
儲(chǔ)存條件：2-8℃
檢測(cè)方法：ELISA方法
預(yù)期用途：可用于定量人檢測(cè)血清、血漿中總的IgE抗體的含量
參考價(jià)格：詢價(jià)
供應(yīng)商家：深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司

IgE簡(jiǎn)介

人體中的IgE是一種特殊的免疫球蛋白，它是過(guò)敏反應(yīng)的一種重要介導(dǎo)因素。反應(yīng)的機(jī)制涉及到免疫活性的B淋巴細(xì)胞被特異性抗原所造成的抗原刺激。之后淋巴細(xì)胞產(chǎn)生幾種類型的抗體，其中IgE抗體通過(guò)它的FC部分結(jié)合到肥大細(xì)胞以及嗜堿性白血球的表面受體上，再次接觸到過(guò)敏原時(shí)，細(xì)胞表面綁定的IgE就會(huì)通過(guò)它們的Fab部分與過(guò)敏原結(jié)合。這一結(jié)合會(huì)引起肥大細(xì)胞以及嗜堿性白血球釋放各種血管活性胺到血液以及周邊組織中去。這些物質(zhì)會(huì)引起平滑肌收縮并導(dǎo)致水痘、潮紅、麻疹、鼻炎、皮炎、花粉熱、哮喘以及過(guò)敏性休克。IgE檢測(cè)可有效的用于診斷已知或懷疑患有過(guò)敏性疾病的病人。正常情況下，IgE的值與年齡有關(guān)，并且在10-14歲急劇增加。有家族遺傳性過(guò)敏疾病的嬰兒及兒童有很高的風(fēng)險(xiǎn)會(huì)患有疾病，因此他們是主要的篩查對(duì)象。研究顯示哮喘、鼻炎、濕疹、蕁麻疹、皮炎以及一些蟲(chóng)感染都有可能增加IgE水平。哮喘、花粉熱以及特異性濕疹病人會(huì)比正常病人IgE水平高出3-10倍。

試劑盒檢測(cè)原理

過(guò)敏原總IgEelisa檢測(cè)試劑盒采用酶聯(lián)免疫吸附法。微孔板上包被有單克隆的小鼠抗人IgE抗體。病人血清以及標(biāo)準(zhǔn)品加入到微孔中后，與之后加入的抗人IgE辣根過(guò)氧化酶結(jié)合物一同孵育。最后血清中的IgE與兩種抗體形成夾心復(fù)合物。洗板后加入TMD底物液孵育15分鐘，之后加入終止液顯出黃色。之后在450nm讀取吸光值，結(jié)果會(huì)與IgE濃度成正比。

總IgEelisa試劑盒預(yù)期用途

總IgE檢測(cè)試劑盒可用于定量人檢測(cè)血清、血漿中總的IgE抗體的含量。可進(jìn)一步應(yīng)用與其他體液的檢測(cè)，如有需要請(qǐng)聯(lián)系IBL的技術(shù)人員。

總IgE檢測(cè)試劑盒組成
●1×12×8——微孔板——包被有單克隆抗IgE抗體
●1×1ml-1×5×0.2ml——標(biāo)準(zhǔn)品A-F——標(biāo)準(zhǔn)品A 1mL
含量0、5、25、100、250、1000U/ml 含人血清PBS稀釋液 1%疊氮化吶
●20ml——酶聯(lián)物——羊抗IgE抗體與辣根過(guò)氧化酶結(jié)合物、蛋白緩沖液
●15ml——底物液——含TMB
●15ml——終止液——0.5M 硫酸
●60ml——洗滌液——10倍濃縮
●2 x——封板紙
●1 x——自封袋

總IgE檢測(cè)試劑盒檢測(cè)所需材料（試劑盒內(nèi)不提供）
●10μl、200μl、500μl移液器
●酶標(biāo)儀
●洗板機(jī)
●試管
●蒸餾水

總IgE檢測(cè)試劑盒檢測(cè)步驟
●選取好足夠數(shù)量的板條，放置在架子上。
●每個(gè)對(duì)應(yīng)的孔中加入10μl樣品、標(biāo)準(zhǔn)品，然后每個(gè)孔加入200μl酶聯(lián)物。留一個(gè)孔做空白對(duì)照
●蓋板，在室溫下溫育30分鐘
●清空微孔，用300μl洗液洗3次
●每個(gè)孔加100μl底物液，室溫避光溫育15分鐘
●每孔加入100μl終止液
●60分鐘內(nèi)在450nm下讀數(shù)（參照波長(zhǎng)620nm）

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