美國(guó)DRG*，貨號(hào)EIA4460

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預(yù)期用途

此酶免試劑盒可檢測(cè)人血清和尿液中的胰淀粉酶

僅供研究使用，不能用于診斷

實(shí)驗(yàn)原理

此酶免試劑盒依據(jù)的是夾心法原理。包被孔內(nèi)包被有抗人胰淀粉酶抗體，樣品與酶聯(lián)物在包被孔內(nèi)孵育，未結(jié)合的酶聯(lián)物被洗去，樣品中的人胰淀粉酶濃度與結(jié)合的酶聯(lián)物量成正比，加入底物液后，樣品中的人胰淀粉酶濃度與顏色的強(qiáng)度成正比

注意事項(xiàng)

1.       此試劑盒僅用于研究，不能用于診斷

2.       不同批次的試劑盒成分不能混合使用

貯存和穩(wěn)定性

1.       試劑盒裝在含有干燥劑的密封袋內(nèi)，貯存于2-8℃冰箱內(nèi)

2.       未打開的試劑盒可保存至有效期

3.       TMB底物液帶有微弱的顏色，如變藍(lán)，則應(yīng)丟棄。貯存或使用期間不要將試劑暴露于強(qiáng)光下。

試劑盒組成

1.       微孔板，96T，包被有抗人胰淀粉酶抗體

2.       樣品稀釋液，11ml，1瓶

3.       酶聯(lián)物，11ml，HRP標(biāo)記的抗人胰淀粉酶抗體

4.       參考標(biāo)準(zhǔn)品0.3ml/支，濃度為：10,50,150,300,600U/L

5.       質(zhì)控品，0.3ml，參考值見瓶身

6.       TMB底物液，11ml，含過氧化氫和TMB的緩沖液

7.       洗滌緩沖液，100X，10ml，工作洗滌液的配制：10ml洗滌液+990ml去離子水

8.       終止液，2N HCL

9.       板架

實(shí)驗(yàn)所需材料但試劑盒未提供

1.       酶標(biāo)儀

2.       移液器，體積“10,50,100ul

3.       1L洗滌緩沖液

樣品采集與處理

靜脈穿刺采集全血，允許凝集，室溫下通過離心分離出血清，貯存于無菌試管內(nèi)

如果血清不立即使用，則可保存于2-8℃下1個(gè)月，或是在-20℃凍存6個(gè)月。避免反復(fù)凍融

實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

1.       實(shí)驗(yàn)前，將所有試劑平衡至室溫，輕輕振蕩

2.       準(zhǔn)備好實(shí)驗(yàn)所需的所有試劑，一旦實(shí)驗(yàn)開始，就不能中斷

3.       每個(gè)樣品都使用新槍頭吸取

實(shí)驗(yàn)步驟

1.       將實(shí)驗(yàn)所需的板條固定好

2.       加10ul的標(biāo)準(zhǔn)品和樣品于相應(yīng)的孔內(nèi)

3.       每孔加入100ul的酶聯(lián)物

4.       室溫下孵育60min

5.       洗滌液洗板5次（300ul/孔）

6.       每孔加入100ul的TMB底物液，包括blank 孔

7.       室溫下孵育30min

8.       每孔加50ul終止液終止反應(yīng)，然后在酶標(biāo)儀450nm處讀數(shù)

結(jié)果計(jì)算

1.       以參考標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為X軸，吸收值為Y軸，在坐標(biāo)紙上繪制曲線

2.       從標(biāo)準(zhǔn)曲線上可得到樣品中胰淀粉酶的值

標(biāo)準(zhǔn)曲線經(jīng)典例子

 

 

 

 

 

附：采用全自動(dòng)酶標(biāo)儀檢測(cè)，只需檢測(cè)前設(shè)置好酶標(biāo)儀的相關(guān)參數(shù)，如坐標(biāo)參數(shù)（線性，半對(duì)數(shù)）和計(jì)算方式參數(shù)（三次回歸、四參數(shù)或雙對(duì)數(shù)曲線方程），可直接得出結(jié)果

 

 

 

 

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